肉鸡呼吸道疾病属多病因呼吸道病综合征，常造成肉鸡养殖的严重损失，死淘率可达30%以上。呼吸道疾病高发的原因主要是由于H9N2亚型禽流感病毒（H9N2）、新城疫病毒（NDV）、传染性支气管炎病毒（IBV）等病毒感染，H9亚型禽流感是鸡病中最为常见的疫病，从病原分离的情况来看，各地也有差异，但分离率比较高的还是禽流感H9病毒、NDV、IBV和大肠杆菌，且多是两种或两种以上的病原混合感染，导致鸡群发病率和死亡率高，治疗效果不显著，经济损失严重。针对上述问题主要采用抗生素等西药控制，控制激发感染，对病毒没有效果。

　　许多中草药被研究证实具有增强免疫力、抑制和杀灭病原微生物的作用。具有毒副作用小、安全高效等特点，成为兽药领域抗病毒药研究开发的热点。该试验以IBV和H9N2为受试病毒，确定笃温康对H9禽流感病毒在鸡胚内复制的抑制作用和对人工感染H9和IBV的SPF肉鸡的保护作用，证明笃温康具有明显的抗病毒效果。

　　一、材料与方法

　　1.1 供试药物

　　笃温康，潍坊诺达药业有限公司提供，板蓝根、甘草、金银花、连翘、赤芍、栀子等中药经提取后，经有先进技术炮制后制备而成，每毫升含生药0.4g。

　　1.2 毒株

　　H9病毒流行毒株1167，由山东省农业科学院保存，测定病毒对SPF鸡胚的半数致死量为(EID50)5.1X109.5/mL，对SPF鸡半数致死量(LD50)。IBV病毒由山东省农业科学院保存，测定对SPF鸡的半数致死量为(LD50:6.1X109.5/mL)

　　1.3 鸡胚和鸡

　　SPF鸡胚、SPF鸡购自山东省斯派福瑞禽业科技有限公司。SPF鸡饲养在不锈钢正压隔离器中，空气经过过滤除菌，饮水和饲料经过消毒处理后通过传递舱进入饲养室，所有试验均在生物安全三级实验室进行，攻毒试验均在山东农科院家禽研究所SPF隔离罩内进行。

　　1.4 实验方法

　　1.4.1 中兽药笃温康对H9禽流感病毒在鸡胚内复制的抑制作用

　　把H9禽流感病毒按照10倍倍比稀释，每个稀释度分别取500ul与等量的笃温康混匀，在室温作用30min，取0.2ml混和液接种9日龄SPF鸡胚，每个稀释度接种8枚SPF鸡胚；对照组直接用105.5 EID50的病毒液接种10枚SPF鸡胚。放置37℃温箱孵化，72h后无菌收每个鸡胚尿囊液，用0.75%鸡红细胞测尿囊液血凝价[3]，并记录。

　　1.4.2 中兽药笃温康对SPF鸡的IBV病毒、H9禽流感病毒攻毒保护试验

　　将SPF鸡分为4组，每组13只，12日龄时进行人工感染H9和IBV病毒，感染用量为H9,IBV，在感染后第二天，人工灌服笃温康，连续观察5天，记录其精神状况、死亡情况、是否咳嗽、死亡的解剖观察肾脏病变等情况，7天后每组随机挑取3只解剖观察病变情况[4]。试验结束后，剩余鸡只使用安乐死后高压灭菌处理。

　　实验分组如表

二、试验结果

2.1 中兽药笃温康对H9禽流感病毒在鸡胚内复制的抑制作用

　　实验结果见下表：可以看出，笃温康能够****抑制病毒10倍稀释液，而不让病毒在鸡胚内复制。也就是笃温康产品对禽流感病毒有一定的抑制效果；笃温康抑制低致病性H9禽流感病毒在鸡胚上复制的****浓度是：5.1x108.5/ml.  

表2中药+病毒接种鸡胚结果：

注：“+”，表示每个鸡胚尿囊液有血凝性，“ —”表示每个鸡胚尿囊液无血凝性

2.2 中兽药笃温康对SPF鸡的IBV病毒、H9禽流感病毒攻毒保护试验

　　使用H9和IBV攻毒后5天，对照组出现现采食量下降、咳嗽、流鼻液症状，实验组上述症状比对照轻，观察期间对照组出现3只死亡，实验Ⅰ组和Ⅱ组均出现1只死亡，实验Ⅲ组没有死亡，对死亡鸡解剖发现对照组均出现花斑肾、肾肿症状、气管环出血，实验组死亡肉鸡出现肾肿，轻微花斑肾，气管出血。

　　实验分组如表三、讨论

　　3.1 禽流感弱病毒能在尿囊腔增殖，并产生感染性子代病毒，也可以在许多组织和器官中增殖，引起全身性感染，造成鸡胚死亡。本试验中笃温康抑制H9病毒在SPF鸡胚上增殖原因有二：其一，可能与笃温康的PH值为4.5，呈现弱酸性有关。研究表明酸性物质与病毒作用后导致病毒失活，病毒失去了在鸡胚上的增殖特性。其二，笃温康可能抑制了H9病毒的增殖，使病毒不能正常增值，导致病毒失去了感染鸡胚的活性，从而保证了鸡胚的存活。

　　3.2 本试验表明中兽药笃温康每只按0.1ml,0.3ml,0.5ml剂量灌服5天，可以保护H9、IBv病毒的攻击。其可能的原因是笃温康通过血液吸收后，进入机体后，通过抑制H9、IBv病毒在鸡体靶细胞上的增殖，降低了病毒的感染和侵害机会，缓解了病毒对气管、肾脏等靶器官的损伤，消除了机体弥散性血管内出血，从而控制了病毒攻击引起的死亡。本试验中高剂量组0.5ml/只，鸡体内靶器官病变减轻，没有死亡，也证实笃温康可以减轻病毒的侵害。

　　3.3 本试验表明中兽药笃温康能够降低H9和IBV病毒造成的死淘，除上述实验表明抑制病毒增值外，还有可能与笃温康组方有关，笃温康的组成药物主要为清热解毒和滋阴凉血中药为主，清热解毒中药能够降低病毒引起的发热、渗出、出血等症状，减轻对机体靶器官的损伤，机体自身免疫机能能够正常发挥清除病原微生物的作用，滋阴中药能够促进体内水分的正常代谢，保证机体水液代谢平衡，起到维持机体正常机能的作用。