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中兽药对雏鸡免疫器官及T淋巴细胞数量的影响

2019/4/23 12:49:48      点击:

  免疫是机体识别自我物质和排除异己物质的一种保护性生理反应,它具有防御传染病,维护自身稳定和免疫监视的机能,动物机体免疫功能直接影响其抗病能力及接种疫苗后的免疫效果。目前一些传染病由于疫苗自身的缺陷或机体免疫功能低下等原因,致使免疫效果不理想、导致免疫失败,从而造成疫病暴发,给养殖业造成了巨大经济损失;因此如何提高动物肌体免疫力,增强疫苗免疫效果,是现代化规模养殖企业目前最需要完成的课题。免疫增强剂的研究已引起国内外学者的重视,一些中草药及复方制剂能够明显提高机体T-淋巴细胞的数量,起到免疫调节作用,国内这方面的研究已经很多,并且取得了一定成绩。本研究通过在商品肉鸡群中添加一种纯中兽药产品-芪术增免合剂,来评价它对肉鸡免疫器官发育的影响,以及对肉鸡促生长的作用,以期找到一种提高肉鸡免疫力的方法。

1材料与方法:

1.1实验动物:健康的快大型白羽肉鸡,由中慧种禽公司提供,芪术增免合剂由潍坊诺达药业公司提供,主要成分是白术、黄芪等中草药提取口服液;20只1日龄雏鸡随机分成2组,其中一组是试验组:3日龄开始喂药,按照饮水量的0.1%添加芪术增免合剂,连续使用5-7天,间歇一周后,再连续使用5-7天。一直饲养到21日龄。另一组作为对照,不添加芪术增免合剂。

1.2 检测外周血中CD4+CD8+ 两种T细胞亚群百分率:分别在7、14、21日龄心脏采集抗凝血,采用FCM法检测外周血中CD4+、CD8+ T细胞亚群百分率。

1.3 免疫器官指数测定:21日龄,试验组和对照组中每只鸡空腹称重完成后,按照常规方法屠宰,分离每只鸡的胸腺、脾脏和法氏囊器官组织,记录每个免疫器官的重量。计算免疫器官指数:免疫器官指数=免疫器官湿重(mg)/体重(g)。

1.4试剂与仪器:鼠抗鸡PE-CD4+、 PE-CD8+单克隆抗体为Southern Biotech公司产品;流式细胞仪为美国BD公司产品。

1.5数据处理:结果以平均数±标准差(Mean±SD)表示。应用SPSS V13.0进行单因素方差分析。P

2 结果

2.1 血液中T淋巴细胞百分含量

外周血中,CD4+  T淋巴细胞所占比例随着肉鸡日龄增加而成下降趋势,试验组明显高于对照组,差异显著(P<0.05)。也就是芪术增免合剂能延缓小鸡外周血液中CD4+  T淋巴细胞比例下降的趋势,具体结果见表1.


和CD4+ T淋巴细胞相似,在外周血中CD8+ T淋巴细胞,随着鸡群日龄增加,所占比例呈下降趋势;试验组中的数值显著高于对照组,差异显著(P<0.05)。芪术增免合剂同样能延缓小鸡外周血液中CD8+ T淋巴细胞比例下降的趋势,具体结果见表2。

2.2 芪术增免合剂对免疫器官的影响

    21日龄剖杀试验组和对照组中所有鸡只,试验组中鸡只的免疫器官比对照组鸡只的免疫器官发育的好,胸腺、脾脏、法氏囊的免疫指数分别高于对照组,差异显著(P<0.05)。同时可以发现试验组鸡只体重增量均高于对照组中的鸡只。具体结果见表3

3 讨论

近年来,随着畜牧业迅速发展,肉鸡的规模化养殖程度越来越高,但是控制疾病的水平并没有明显提高;规模化养鸡场,由于环境应激、营养问题、免疫抑制性病毒感染等原因引起鸡群的免疫抑制现象非常普遍。鸡群的免疫抑制导致疫苗免疫效果不确实,从而造成鸡群易感各种病毒和细菌性疾病,给养殖业造成巨大经济损失。总结许多鸡场养殖失败的教训,大多是在免疫前后3~5天出现病毒感染,随后继发细菌和病毒病而出现大批死亡。规模化鸡场当前最大的困难就是如何降低鸡群对疫苗的免疫反应,免疫成功与否成为规模化养殖成功的关键因素。

胸腺、脾脏、法氏囊是鸡的重要免疫器官,免疫器官发育的好坏直接关系到肌体对疫苗的免疫应答强弱,最终影响到鸡群对病毒性疾病的预防效果。因此如何提高鸡群整体免疫力,抵抗禽流感等烈性传染病的爆发,成为鸡场疫病防控的一个重要工作。许多研究表明,一些中兽药具有增强和调节免疫的作用,能促进动物免疫器官发育,增强机体的细胞免疫和体液免疫功能;而且中兽药免疫增强剂属于绿色药物,药源丰富,价格低廉,毒副作用小,符合国际兽医学发展的需求。本研究结果表明,商品肉鸡在饲料中定期添加中兽药产品“芪术增免合剂”有助于胸腺、脾脏、法氏囊等免疫器官的发育(表3),提高鸡群对疫苗免疫应答能力,增强疫苗的保护效果。

鸡CD4+ T 细胞具有辅助功能,辅助产生抗体的B细胞和γδT细胞的分化和增值;鸡 CD4+ T 细胞分泌不同的淋巴因子于细胞外,在免疫反应中作为协调者,对其附近的抗原提呈细胞 (如巨噬细胞和B 细胞)发挥作用。此外,CD4+ T细胞可能在异物排斥反应,或起码在异物排斥反应的起始阶段起重要作用。本研究结果表明:通过给小鸡定期饲喂一些中兽药成分的免疫增强剂,可以明显增加T淋巴细胞CD4+的百分含量(表1),CD4+ T 细胞在细胞外分泌的淋巴因子数量增加,协调免疫反应的能力就会加强,最终提高疫苗的免疫效果。

鸡CD8+ T细胞也具有杀伤功能和抑制功能。CD8+ T细胞发挥其杀伤和抑制功能时受 MHC I类抗原的限制。通常细胞内合成的抗原提呈给CD 8 T细胞时已变成了细胞内病原的片段,如病毒片段。此时,在 MHC I类抗原存在的情况下,C D 8+ T细胞在新的病毒粒子合成和释放之前杀伤抗原提呈细胞,阻止病毒的感染,而其抑制作用可能是通过组胺二类受体 ( H 2 )起作用的。鸡C D8+ T细胞同时具有抗肿瘤和辅助产生抗体的功能。本研究结果表明:通过给小鸡定期饲喂一些中兽药成分的免疫增强剂,也可以明显增加T淋巴细胞CD8+百分含量(表2);C D 8+ T细胞的增加就会增加肌体抵抗病毒感染的机会,因此鸡群感染免疫抑制病毒病的机会降低,相对增强了机体非特异性免疫力。

综上所述,中兽药芪术增免合剂不仅有助于免疫器官发育,也能通过增加外周血液中CD4+ 和CD8+ 两种T细胞数量来增强肌体协调免疫反应的能力和抗病毒感染的能力;从而降低肉鸡感染病毒性疾病的机会,同时加强鸡群自身非特异性免疫能力。